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CD4检测 编辑
CD4检测是指对细胞表面的CD4抗原进行标记并计数的方法。CD4是指分子量为55kDa、存在于细胞膜表面的单链糖蛋白,表达于部分T淋巴细胞、胸腺细胞及某些B淋巴细胞、EB病毒转化的B细胞、单核-巨噬细胞及脑细胞膜上。CD4检测有助于某些免疫疾病、感染疾病等的诊断。
向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取静脉血进行检测,采血前一天应清淡饮食、晚8点后避免进食和剧烈运动、避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张。
1.免疫组织化学染色法
(1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与标本切片中细胞表面的CD4进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。
(2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记CD4对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯二酚将银离子还原成银原子,被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”,最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质,而且能检测微量的抗原。
2.流式细胞术
利用荧光素标记的CD4对应的单克隆抗体做分子探针,在流式细胞仪上检测CD4的表达,计数CD4阳性细胞的百分率。
使用免疫荧光法测定的正常值参考范围为55%~65%。增高见于移植手术后急性排斥反应、类风湿关节炎活动期、心肌病、慢性肝炎、硬化病及皮肤黏膜淋巴结综合征等;减低见于某些病毒性感染,如获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)、疱疹病毒感染等,也见于无或低丙球蛋白血症以及某些细菌感染、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等。
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